Kỹ thuật ELISA và ứng dụng trong chẩn đoán bệnh ký sinh trùng ở người

Kỹ thuật ELISA

ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) là một kỹ thuật dựa trên phản ứng hóa sinh được sử dụng để phát hiện các kháng nguyên hay kháng thể. Kỹ thuật này được xem là một công cụ nghiên cứu, chẩn đoán quan trọng trong lĩnh vực y học, sức khỏe động vật, khoa học môi trường, thực vật, an toàn vệ sinh thực phẩm hay trong ngành công nghiệp… 

ELISA là một trong những kỹ thuật phân tích miễn dịch có độ nhạy cao. Độ nhạy này phụ thuộc vào đặc tính tương tác của kháng nguyên và kháng thể. Chúng có thể phát hiện các kháng nguyên hay kháng thể có hàm lượng trong phản ứng từ 0,01 ng đến 0,1 ng.

Xét nghiệm bằng kỹ thuật ELISA tương đối đơn giản, tiết kiệm thời gian và có thể thiết kế để triển khai phân tích các mẫu cùng lúc. 

Một phân tích ELISA thường được thực hiện với 8 bước cơ bản như sau: 

Bước 1: Gắn kháng nguyên hoặc kháng thể lên giá thể rắn; 

Bước 2: Bổ sung các mẫu xét nghiệm, thử nghiệm và thuốc thử;

Bước 3: Ủ hỗn hợp phản ứng; 

Bước 4: Rửa trôi các thành phần phản ứng không được liên kết trên giá thể rắn; 

Bước 5: Bổ sung thuốc thử có gắn enzyme thủy phân cơ chất; 

Bước 6: Bổ sung các cơ chất đặc trưng của enzyme; 

Bước 7: Dừng phản ứng bằng cách bổ sung các dung dịch thay đổi pH môi trường phản ứng 

Bước 8:  Đọc kết quả bằng mắt thường hay máy quang phổ tại bước sóng xác định.

Ứng dụng ELISA trong chẩn đoán bệnh ký sinh trùng 

Hiện nay, chẩn đoán bệnh ký sinh trùng được thực hiện bởi nhiều phương pháp kỹ thuật khác nhau, để phát hiện tác nhân gây bệnh là các loại ký sinh trùng đang “ký sinh” trong vật chủ và tìm cách loại bỏ chúng. Tuy nhiên, tùy vào triệu chứng và diễn biến của bệnh nhân, bác sĩ sẽ chỉ định một số phương pháp chẩn đoán đối với từng trường hợp bệnh nhân khác nhau. Hầu hết các bệnh viện và phòng khám hiện nay đều sử dụng kỹ thuật ELISA.

Kỹ thuật ELISA phát hiện hầu hết các loại ký sinh trùng xâm nhập vào cơ thể người thông qua đáp ứng miễn dịch của cơ thể đối với  loại ký sinh trùng đó. Tuy nhiên, tùy theo mỗi loại ký sinh trùng mà độ đặc hiệu của kháng thể đáp ứng với các tác nhân đó khác nhau. Ví dụ, một số kit ELISA phát hiện ký sinh trùng như giun đũa chó, sán lá gan lớn,..… có độ nhạy rất cao, và độ đặc hiệu đạt có thể đạt đến 93.3 %.

Giải pháp xét nghiệm chẩn đoán ký sinh trùng ở người

Xét nghiệm ký sinh trùng là cách để chẩn đoán bệnh ký sinh trùng nhằm giúp người bệnh có kết quả chính xác nhất về tình trạng bệnh đang mắc phải. Thông thường, xét nghiệm kháng thể kháng ký sinh trùng được chỉ định khi có nghi ngờ do ký sinh trùng gây ra, hoặc có ký sinh trùng lạc chỗ khi mà các phương pháp xét nghiệm  ký sinh trùng khác không xác định được. Ngoài ra, phương pháp xét nghiệm này còn dùng để tầm soát nhiễm ký sinh trùng trong cộng đồng. 

AccuElis Fasciola spp. Detection Kit của hãng sản xuất Khoa Thương, là một xét nghiệm phát hiện kháng thể IgG kháng sán lá gan lớn (Fasciola gigantica và Fasciola hepatica) trong mẫu huyết thanh người. Xét nghiệm này dựa trên nguyên tắc ELISA.

Thành phần hóa chất

Cách tiến hành

Kháng nguyên tái tổ hợp đặc hiệu cho sán lá gan lớn (Fasciola gigantica và Fasciola hepatica) được gắn sẵn trên bề mặt các giếng của đĩa ELISA. Đầu tiên, sẽ tiến hành ủ với mẫu huyết thanh đã pha loãng của bệnh nhân để các kháng thể phản ứng với kháng nguyên gắn lên bề mặt giếng. Sau đó, loại bỏ các thành phần không phản ứng với kháng nguyên trong mẫu thông qua bước bước rửa. Tiếp đến, tiến hành ủ với dung dịch kháng thể thứ cấp liên kết với enzyme. Kháng thể thứ cấp nào không được gắn lên giếng sẽ bị loại bỏ qua bước rửa. Cuối cùng, lại tiếp tục ủ với dung dịch cơ chất, enzyme trong giếng (nếu có) sẽ xúc tác phản ứng chuyển cơ chất từ không màu thành màu xanh. Màu xanh sẽ chuyển thành màu vàng khi cho dung dịch dừng phản ứng vào giếng. Đọc kết quả bằng máy đọc ELISA ở bước sóng 450/620 nm.

Phân tích kết quả

Kết quả được đọc bằng máy đọc ELISA tại bước sóng 450/620 nm.

Nếu cần tư vấn, hỗ trợ về sản phẩm, hãy liên hệ ngay với chúng tôi:
Công ty TNHH Khoa học NKTBIO
VPGD: Số 60, đường số 13, Khu Dân cư Bình Hưng, ấp 2, xã Bình Hưng, huyện Bình Chánh, TPHCM.
Hotline: 028.3636.5898
Email: info@nktbioco.com