Phát hiện Listeria monocytogenes bằng Real-time PCR: Một công cụ đầy hứa hẹn để kiểm tra an toàn thực phẩm

Listeria monocytogenes là một loại vi khuẩn Gram dương có thể gây ra những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm qua thực phẩm, đặc biệt là đối với những đối tượng dễ bị tổn thương như: phụ nữ mang thai, trẻ sơ sinh, người già và bệnh nhân suy giảm miễn dịch. Các phương pháp phát hiện Listeria monocytogenes, chẳng hạn như các kỹ thuật dựa trên nuôi cấy hay xét nghiệm ELISA thường có độ nhạy và độ đặc hiệu thấp, thời gian trả kết quả lâu. Trong khi đó, Real-time PCR, một kỹ thuật sinh học phân tử phát hiện tác nhân gây bệnh trong mẫu thực phẩm, như một sự thay thế đầy hứa hẹn cho việc phát hiện nhanh chóng và đáng tin cậy.

Giới thiệu về Listeria monocytogenes

Listeria monocytogenes là vi khuẩn thuộc họ Phylum có vách dày, không có vỏ bọc, không hình thành bào tử, tan máu beta, hiếu khí, được đặt theo tên của Joseph Lister. Loại vi khuẩn này chủ yếu sử dụng thực phẩm như một vật trung gian, là một trong những mầm bệnh có thể gây chết người từ thực phẩm.

Vi khuẩn Listeria monocytogenes có mặt ở khắp nơi trong môi trường, được tìm thấy trong hầu hết các loại thực phẩm. Thịt, trứng, thịt gia cầm, hải sản, các sản phẩm từ sữa, rau quả,… đều đã được chứng minh là nguồn lây nhiễm vi khuẩn Listeria monocytogenes. Ngộ độc vi khuẩn Listeria monocytogenes có thể gây nhiễm trùng máu và mô não. Nhiều quốc gia đã thực hiện các biện pháp để kiểm soát vi khuẩn Listeria monocytogenes trong thực phẩm và đã đưa ra các tiêu chuẩn tương ứng.

Nguyên lý và ưu điểm Real-time PCR

Real-time PCR là một kỹ thuật sinh học phân tử dựa trên việc phát hiện các trình tự DNA cụ thể trong một mẫu xét nghiệm… Kỹ thuật này sử dụng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc đầu dò để theo dõi sự nhân bản DNA mục tiêu trong thời gian thực, cho phép phát hiện sản phẩm nhân bản trong thành phần phản ứng PCR. 

Real-time PCR có một số lợi thế so với các phương pháp phát hiện truyền thống bao gồm: độ nhạy, độ đặc hiệu cao, thời gian trả kết quả nhanh.

Ứng dụng kỹ thuật Real-time PCR để chẩn đoán Listeria monocytogenes

Các bộ Kit Real-time PCR phát hiện Listeria monocytogenes hoạt động dựa trên việc nhân bản đoạn trình tự mục tiêu bằng hệ mồi – mẫu dò đặc hiệu và có thể đọc trực tiếp kết quả dựa trên tín hiệu huỳnh quang thu được. Hỗn hợp phản ứng PCR chứa một cặp mồi nhân bản một phần đoạn gene iap, mã hóa cho các endopeptidase được tiết ra trong quá trình xâm nhiễm vật chủ, đặc trưng cho L.monocytogenes. Sản phẩm nhân bản được phát hiện bởi tín hiệu huỳnh quang có được do sự phân cắt mẫu dò TaqMan đánh dấu màu FAM đặc hiệu cho L. monocytogenes. Hỗn hợp phản ứng PCR còn chứa sẵn một đoạn DNA nhân tạo gọi là “chứng nội kiểm soát sự nhân bản” (Internal Amplification Control – IAC) được thiết kế có chứa vùng trình tự mẫu dò phát huỳnh quang màu HEX. Việc sử dụng IAC giúp phát hiện các chất ức chế có trong mẫu và kiểm soát hiệu quả nhân bản của phản ứng PCR.

Giải pháp của chúng tôi cung cấp

Công ty TNHH Khoa học NKTBIO đang cung cấp dòng kit AccuPid Listeria monocytogenes Detection (Hãng Khoa Thương – Việt Nam) được sử dụng để phát hiện mẫu thực phẩm bị nhiễm vi khuẩn Listeria monocytogenes theo chỉ tiêu định tính: có nhiễm hoặc không nhiễm L.monocytogenes. Xét nghiệm này có khả năng ứng dụng trên 5 nền mẫu thực phẩm: Thịt và sản phẩm thịt đã qua xử lý nhiệt; sữa dạng lỏng (sữa tươi); sữa dạng bột; cá và thủy sản tươi; sản phẩm chế biến từ cá và thủy sản.

Nếu cần hỗ trợ tư vấn hoặc đặt mua sản phẩm thì hãy liên hệ ngay với chúng tôi:
Công ty TNHH Khoa học NKTBIO
VPGD: Số 60, đường số 13, Khu Dân cư Bình Hưng, Ấp 2, xã Bình Hưng, huyện Bình Chánh, TP.HCM.
Hotline: 028.3636.5898
Email: info@nktbioco.com